原卟啉(FEP)检测试剂盒(荧光比色法)后者在紫外线照射下会发出荧光，可通过荧光比色法测定FEP含量，该试剂盒主要用于检测人、动物血液的红细胞内游离

原卟啉(FEP)的含量，反映缺铁性贫血的程度，但应事先或者事后检测相应的红细胞比容。该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

三、自备材料：

1、离心管或小试管

2、蒸馏水

3、酶标仪、96孔板

四、操作步骤(仅供参考)：

1、配制组织匀浆液(1×)∶取10ml组织匀浆液(3×)加入20ml蒸馏水即成。

2、配制PA Assay Buffer (1x)∶取10ml PA Assay Buffer (1.5×)加入5ml蒸馏水即成。

3、准备样品︰

①血清、尿液及其他体液样品:血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-20°C冻存。

②组织样品︰称取1g组织样品置于匀浆器中，再加入1ml组织匀浆液(1x)仔细研磨，振摇提取静置30min ,取上清液4000rpm离心10min ,取上清液,用组织匀浆液(1×)定容至2ml , -20℃冻存，用于PA的检测。

③植物材料︰称取1g植物材料置于匀浆器中，再加入1ml组织匀浆液(1×)仔细研磨，振摇提取,静置30min ,取上清液4000rpm离心10min ,取上清液,用组织匀浆液(1×)定容至2ml , -20℃冻存，用于PA的检测。

④高浓度样品:如果样品中含有较高浓度的PA，可以使用原有的裂解液或PBS等进行稀释，如鸡血清可稀释5～10倍后检测。

4、配制标准品工作液︰如果检测血清、尿液等样品，按取丙酮酸标准(6mg/ml):蒸馏水=1：99的比例配制，使浓度达到60μg/ml，如果检测组织样品按丙酮酸标准(6mg/ml) :组织匀浆液(1×)=1:99的比例配制，使浓度达到60μg/ml。

注意事项:

1、实验材料应尽量新鲜，如取材后不立即使用，应存于-20°C.

2、实验用蒸馏水不能含有二氧化碳，可用新煮沸且冷却后的蒸馏水，并盖紧口。

3、TA滴定液为碱性溶液，有腐蚀性，请小心操作。

4、TA标定液容易长菌，宜4℃保存，一旦发现有絮状物请弃用。

5、果实中含酸量较少时可将TA滴定液适当稀释后使用，可考虑用0.01~0.05M  TA滴定液进行滴定。

6、TA滴定液含量计算公式中，V0最好为3次空白测定的平均值。

7、如果所测样品的浓度过高，应用TA Lysis Buffer工作液稀释样品后重新测定，并将稀释倍数带入公式。

8、如果样品颜色较深，滴定终点不易观察，应采用电位滴定法。

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