铁是人体必需微量元素，总含量约为3270mg，铁分布较广，有67.6%的铁作为血红蛋白分子的辅基分布于血红蛋白中，

参与铁的运输；骨骼和肌红蛋白中各存在2.59%和4.15%，储存铁约占25.37%血清中铁均以三价铁离子形式与转铁蛋白

结合，因此测定血清铁时，首先需要Fe3+与转铁蛋白分离；总铁结合力(TIBC)是指血清中转铁蛋白能与铁结合的总量。

铁试剂盒(亚铁嗪微板法)是采用分光光度法以亚铁嗪为底物进行总铁结合力的检测，

是将过量的铁加入待测血清、血浆中，使铁与多余的转铁蛋白结合，游离铁被铁吸附剂吸附除去，在酸性介质中与转铁蛋白

结合的血清铁从转铁蛋白中解离出来，再被还原剂还原为Fe2+，后者与亚铁嗪生成紫红色化合物，通过酶标仪检测562nm

处吸光度值，适用于检测血清、血浆样品中的总铁含量，即为总铁结合力(TIBC)；上述检测方法属于直接检测法，

应设血清空白，纠正血清本身的色度，根据公式计算出铁含量，该检测试剂盒在140μmol/L以下线性关系良好，

甘油三脂≤3.39mmol/L，≤171μmol/L，对本法基本无干扰。该试剂盒仅用于科研领域不适用于临床诊断或其他用途。

操作步骤(仅供参考)：

1、取内径为8mm的玻璃试管2支，分别加入白陶土-脑磷脂混悬液0.2ml。

2、静脉采血1ml，立即取下针头，沿管壁向各试管注入血液0.5ml，立即混匀并启动秒表计时，并置于37℃水浴中。

3、每隔10s轻摇试管一次，观察管内血液流动情况，直至血液凝固。记录血液凝固所需时间，即为ACT。

4、取2支试管血液凝固时间的平均值作为ACT 值。

计算：参考区间： (1.77±0.76)min

4、配制标准品工作液︰如果检测血清、尿液等样品，按取丙酮酸标准(6mg/ml):蒸馏水=1：99的比例配制，使浓度达到60μg/ml，如果检测组织样品按丙酮酸标准(6mg/ml) :组织匀浆液(1×)=1:99的比例配制，使浓度达到60μg/ml。

注意事项:

1、实验材料应尽量新鲜，如取材后不立即使用，应存于-20°C.

2、实验用蒸馏水不能含有二氧化碳，可用新煮沸且冷却后的蒸馏水，并盖紧口。

3、TA滴定液为碱性溶液，有腐蚀性，请小心操作。

4、TA标定液容易长菌，宜4℃保存，一旦发现有絮状物请弃用。

5、果实中含酸量较少时可将TA滴定液适当稀释后使用，可考虑用0.01~0.05M  TA滴定液进行滴定。

6、TA滴定液含量计算公式中，V0最好为3次空白测定的平均值。

7、如果所测样品的浓度过高，应用TA Lysis Buffer工作液稀释样品后重新测定，并将稀释倍数带入公式。

8、如果样品颜色较深，滴定终点不易观察，应采用电位滴定法。

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