Bsu DNA聚合酶 大片段试剂聚合酶是具有链置换活性的DNA恒温扩增聚合酶，主要应用于RPA重组酶扩增。重组酶UvsX与引物结合形成的蛋白-DNA复合物，能在双链DNA中寻找同源序列；一旦引物定位了同源序列，就会发生链交换反应，Bsu DNA聚合酶启动DNA合成，对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合，防止进一步替换。

本Bsu DNA 聚合酶来源于 嗜热脂肪芽孢杆菌（Bacillus subtilis），系将Bacillus subtilis DNA 聚合酶（Bsu） I 基因的前296个AA截去而得。该酶保留了Bsu I 的 5′-3′ 聚合酶活性，但是缺失了 5′-3′ 核酸外切酶结构域，该酶自身缺失 3′-5′ 核酸外切酶活性，可用于重组酶扩增。

应用

随机引物法标记

cDNA 第二条链的合成

单个 dA 的加尾

链置换的 DNA 合成

活性定义

在37℃条件下，30min内参入10nmol酸性不容物定义为1个活性单位。

Bsu DNA聚合酶 大片段试剂聚恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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