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6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit试剂

简要描述:6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit试剂,雅吉生物是一家生物企业主营ATCC细胞,细胞系,原代细胞和培养试剂,重组蛋白,ELISA试剂盒、抗体、荧光定量PCR检测试剂盒

  • 产品型号:D0402
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-08-24
  • 访  问  量:87

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详细介绍

6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit试剂全新一代MLV7反转录酶为RNase H活性缺失型的聚合酶,并含有的快速合成功能域,其将MLV的反转录速度提高了3-4倍

。除此外,MLV7为耐热型,可耐受50℃ 高温反应,在60℃ 条件下仍然具有30%以上活性,利于打开RNA二级结构,从而提高

复杂RNA模板的扩增性能。

基于MLV7开发的,采用稳定高效的反转录预混体系5×Fast RT MasterMix进行

RNA的反转录反应,使用时只需加入模板、引物和RNase Free H2O 即可,大大简化了操作过程、提高了效率、减少了操作

过程中的人为误差。优化的反转录Buffer系统,可以获得更高产量的cDNA,从而提高后续检测的灵敏度。合成的第一链

cDNA可广泛用于2nd Strand的合成、杂交、PCR扩增、Real-Time PCR反应等。

组分

组分名称数量

5×Fast RT MasterMix400 μl

20XOligo dT(25)&Random Primer100 μl

Rnase Free H2O1 ml×2

注:1.该制品可有效反转录mRNA、tRNA、LncRNA、ncRNA。

  2. 该制品不可反转录microRNA。

主要特征

采用全新的MLV7,整个反转录过程只需6min

50℃进行反转录的MLV反转录酶,能更好的转录含有复杂高级结构的RNA模板

高效便捷的反转录预混体系

反转录引物为Random Primer和Oligo dT Primer预混的RT Primer Mix,可更好的合成样品中的各种cDNA

储存

请置于-20°C,可保存2年;避免反复冻融。

性能展示

1.时间与产量

以1μg Hela Total RNA作为起始反转录模板,分别使用6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit 和传统反转录试剂盒(35min),

 对TGFβ、IL-6和GAPDH 3个基因进行qPCR检测,结果显示,6min Fast 1 st cDNA Synthesis Kit获得的cDNA产量与传统

反转录试剂盒相当,无显著差异.


储存

2-8℃避光保存,可保存2年。


6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。

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应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

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应用实例3:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)


以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前,下图为 65 度反应 30min 后。

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雅吉生物是一家生物企业主营ATCC细胞,细胞系,原代细胞和培养试剂,重组蛋白,ELISA试剂盒、抗体、荧光定量PCR检测试剂盒更多产品欢迎咨询。




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