Bst 4.0 Basic Bead试剂为全体系冻干微球制品，内含恒温扩增所用

的反应缓冲液、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶

等，其不包含任何染料，使用时只需要加入引物、模板即

可进行核酸恒温扩增。Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依

赖于 RNA 模板的聚合酶活性（逆转录），还具有依赖于

DNA 的聚合酶活性，因此无论 DNA 或 RNA 样本均可使

用该制品进行恒温扩增。该制品是进行 LAMP 及

RT-LAMP 扩增反应的试剂。

本制品不包含任何显色染料，可自行搭配相关染料

或检测手段进行 LAMP 反应，包括搭配 OG 染料管进行

橙绿变色、搭配标记 Oligo 进行试纸条检测、搭配荧光染

料进行荧光检测、搭配 Molecular Beacon 探针进行荧光

检测等方法。

货 号 名 称 规格

A3828-02 Bst4.0 Basic Bead 100 个

储存：-20℃保存 2 年；室温（25℃）保存>6 个月。

使用方法：（进行 LAMP 橙绿变色扩增）：

1. 关于 OG 橙绿变色管(货号：A3828-21)说明：橙绿变

色染料（OG Dye）以烘干的形式预加在8联管盖上。LAMP

反应完毕后，将 0.2ml EP 管颠倒溶解 OG 染料后。LAMP 

的反应产物将与 OG 染料形成绿色肉眼可见变色反应（阳

性），而未扩增的 EP 管为深橙色（阴性）。本试剂管常温

长期保存。

2. 配制变色 LAMP 反应体系

在 OG 染料管（0.2ml EP）反应管中加入下述试剂

Bst4.0 Basic Bead 1 粒

10xLAMP Primer Mix 2.5 μl

模板 DNA/RNA X μl

ddH2O 到总体积 25 μl

10xLAMP Primer Mix 浓度：FIP/BIP 分别为 16 μM、

LoopF/B 分别为 4~8 μM、F3/B3 分别为 2 μM。

注意：全部试剂加入完毕后，轻弹 EP 管底部后，再盖上 OG 橙

绿变色管（盖上管盖后务必不能再剧烈混合与倒置，以防止将管盖

上的 OG 染料溶解，OG 染料一旦混入反应液中将会终止 LAMP

反应）。

3. 反应体系配好后，置于 65°C 进行反应 15~30min。（扩

增良好的引物组合，通常 20min 即可变色，一般不超过

30min）。

4. 观察结果：反应结束后，从加热装置中将反应管取出，

室温 2min，使整个反应管冷却下来。再次用力将反应管

盖压紧，以防止液体泄露。将反应 EP 管倒置，并手腕轻

甩，反应液浸泡 EP 管盖上的 OG 染料，静置 1min（中

间可轻弹 1-2 次，以加速溶解 OG 染料）。再将 EP 反应

管正置，并轻甩反应液到 EP 管底部，此时扩增样品将变

为鲜艳肉眼可见绿色，而阴性未发生扩增的管将为深橙

色。

注意：（1）观察结果时，尽可能不要与配制反应空间共用，

以防止污染操作台。（2）尽管 HaiGene 选取的为高密封

性的 EP 管，但也时有 EP 管发生液体泄露。在反应管倒

置时，可用纸巾包裹 EP 管，一旦发生泄露，丢弃纸巾，

防止台面污染。（3）整个操作过程，佩戴手套、口罩等个

人防护用品。

注意事项：

（1）关于矿物油的使用，在配制完 LAMP 反应体系后，

可加入一滴矿物油覆盖于反应液上部，以减少气溶胶的污

染?？笪镉筒⒉挥跋?OG 染料的溶解。

（2）在使用其它荧光染料时，使用浓度可自行优化，通

常来讲，参考供应商提供浓度的 0.25~0.8x，过高浓度的

染料可能导致扩增失败。

（3）本试剂不支持，浊度、pH 变色、HNB 变色反应，

请勿尝试。

（4）关于 LAMP 成品试剂的建议， Bst 4.0 Basic Bead

冻干球和 OG 橙绿变色管均为室温稳定状态，可长期保

存。将扩增引物加入到 OG 橙绿变色管底部，于 70°C 烘

干，再加入一粒冻干球即可制备成全体系检测试剂。

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