TGIRT-III Reverse transcriptase试剂具有依赖于DNA/RNA杂交链的反转录酶活性，其具有的延伸性能，因此更易快速获得全长的cDNA能快速合成cDNA，该酶具有强的链转换活性（Switch）。因此，该酶可用于Template-Switching的RNA-seq，如tRNA、ncRNA、miRNA等核酸分子的同步逆转录和加接头（TGIRT template-switching reaction，用于TGIRT-Seq）。除此外，其还可以利用RNA的5’端帽结构进行SMART建库（SMART-Seq）。该酶的反应温度为37-55°C，最佳反应温度为50°C。

应用

非编码RNA转录组测序

RIP-seq, HITS-CLIP, irCLIP and CRAC

通过高通量测序鉴定RNA碱基修饰

长cDNA的合成

储存

长期储存置于-20°C以下，可保存2年；短期使用置于4°C（3个月）保存。

TGIRT-III Reverse transcriptase试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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