ThermoStable Afu Uracil DNA GlycosylaseAfu UDG (2U/µl)试剂耐热尿嘧DNA糖基化酶），它是大肠杆菌尿啶DNA糖基化酶的耐热同源蛋白。该酶能有效地水解单链或双链DNA上的尿嘧(dUMP)，产生缺嘧啶位点(AP)，在高温或高pH下，极易水解断裂。该酶极度耐热，在95℃条件下仍然能保持全部的活性，最佳反应温度为50-75℃。该酶不需要金属离子作为辅助因子。

活性定义

在标准反应体系下，65°C每分钟催化60 pmol 尿啶从含尿嘧的双链DNA上释放所需要的酶量为一个活性单位。

储存

-20℃可保存2年。

酶保存液

20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT, , 50% Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100, pH 7.5。

Afu UDG (2U/µl)试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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