Yeast Nucleoside diphosphokinase试剂催化腺苷三磷酸（ATP）和核苷二磷酸（NDP）之间高能磷酸基团的

转移，在体内负责合成除ATP以外的其它核糖核苷酸的生成。由二核糖核苷酸生成三核糖核苷酸：(d)XDP+(d)YTP?(d)XTP+(d)

YDP。另外,该酶还具有NDP激酶活性和蛋白磷酸转移酶活性,并参与转录调控和信号转导。该蛋白来源于S. cerevisiae，

通过重组表达而得。

组分

组分名称数量

Yeast Nucleoside diphosphokinase

(20 U/μl)50 μl

10xNDPK Buffer1 ml

活性定义

每单位指37度条件下，在ATP存在条件下每分钟转化1.0 μmol TDP到TTP所需酶量。该酶比活为1X10e5 U/mg，制品浓度约200 ng/μl。

储存

-20℃可保存3年。

10xNDPK Buffer

200mM HEPES,pH7.5

1M Potassium glutamate

100 mM Magnesium acetate

50mM DTT

Yeast Nucleoside diphosphokinase试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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